Abstract

Las técnicas de reproducción asistida se han optimizado durante los últimos años. Sin embargo, las condiciones de cultivo in vitro no son homologables a las condiciones de cultivo in vivo, lo que genera una disminución en la tasa de desarrollo embrionario. La exposición de gametos y/o embriones a dosis de estrés subletal activa diversos mecanismos intracelulares que producen tolerancia a estrés y consecuentemente mejorarían el desarrollo embrionario in vitro. El objetivo fue evaluar la tasa de desarrollo embrionario y perfil de expresión génica de blastocistos bovinos generados a partir de ovocitos maduros sometidos a un inductor de estrés oxidativo y nitrosativo [3-morfolinosidnonimina (SIN-1)]. Ovocitos bovinos fueron madurados en TCM-199 suplementado durante 22-23 h a 38,5 ºC y posteriormente tratados durante 1 h con 0, 0,1, 10 o 100 mM SIN-1. La co-incubación de gametos se llevó a cabo durante 18 h (1x106 sp/mL). Los presuntos cigotos fueron cultivados hasta el día 7 en medio KSOM-0,4% FAF-BSA. Se evaluó la expresión relativa de 6 genes involucrados en la regulación del estado redox (PDRX5, eNOS, iNOS, nNOS, HSP70 y HIF1A). La tasa de división y la tasa de generación de blastocistos no disminuyen con ninguna concentración utilizada. Sin embargo, al evaluar la producción in vitro de blastocistos al día 7, existe una disminución en el porcentaje de blastocistos tempranos en comparación al control. De la misma manera, resultados preliminares de expresión génica no observaron diferencias en la expresión relativa de los 6 genes analizados, en comparación al control. La inducción de estrés oxidativo y nitrosativo con SIN-1 mantiene un apropiado desarrollo embrionario. Es posible que estos embriones sean más resistentes y pueden tener una mayor sobrevida durante procesos que generan elevados niveles de estrés, como es la criopreservación. AGRADECIMIENTOS: Proyecto Fondecyt N°1130888, Conicyt, Gobierno de Chile.