Abstract

El estudio químico realizado en 6 muestras de propóleos chilenos nos permitió determinar la presencia de una gran variedad de compuestos fenólicos, tales como las flavanonas pinocembrina y pinobanksina. El propóleo es ampliamente utilizado como antiinflamatorio en la medicina folclórica. Sin embargo, los estudios químicos, farmacológicos y toxicológicos con propóleos chilenos son escasos. El objetivo de este trabajo consistió en evaluar la viabilidad celular y la actividad antiinflamatoria in vitro de las flavanonas pinocembrina y pinobanksina en macrófagos RAW 264.7. La viabilidad celular se determinó mediante el ensayo MTT y la actividad antiinflamatoria fue evaluada mediante la liberación de NO a través de la estimulación de los receptores tipo toll (TLRs), empleando los siguientes ligandos: ácido lipoteicoico (LTA, 1 μg/mL), ácido poliinosínico-policitidílico (pI:C, 1 μg/mL) ligandos específicos de los receptores TLR2 y TLR3 respectivamente y lipopolisacárido (LPS, 1 ug/mL) ligando del TLR4 e integrador de ambas vías. Con este fin los macrófagos se pre-trataron con las muestras a diferentes concentraciones (12,5-100 μM) durante 30 min y posteriormente se estimularon 20 h con los ligandos mencionados anteriormente. La liberación de NO se determinó mediante el método de Griess. Para el análisis estadístico se empleó ANOVA de una vía, seguido del test de Tukey. Se consideró significativo para un p ≤ 0,05. Los ensayos de viabilidad celular confirmaron que las flavanonas no fueron citotóxicas. Pinocembrina presentó los menores porcentajes de liberación de NO frente al estímulo LPS. Sin embargo pinobanksina no presentó diferencias significativas frente a los estímulos LPS y pI:C, siendo éstos menores que los porcentajes obtenidos para el estímulo LTA. Finalmente podemos concluir que ambas flavanonas poseen efecto antiinflamatorio in vitro y el mecanismo propuesto involucraría la inhibición de los receptores TLR2 y TLR3 por pinocembrina y la inhibición del TLR3 por pinobanksina.