Evaluación de la desinfección superficial de raíces y tubérculos de papa (Solanum tuberosum L.) para el aislamiento de bacterias endófitas.
Abstract
Las bacterias endófitas han co-evolucionado junto a las plantas estableciendo una interacción positiva con sus hospederos, mediante mecanismos de promoción del crecimiento vegetal o actuando como antagonistas de fitopatógenos. El estudio de estas bacterias como potenciales agentes de control biológico requiere el aislamiento de estos microorganismos, donde la desinfección superficial de los tejidos vegetales debe ser capaz de remover microcolonias y biopelículas de comunidades bacterianas epífitas. El objetivo de este trabajo fue evaluar un procedimiento de remoción bacteriana y desinfección superficial de raíces y tubérculos de papa (Solanum tuberusum L). Para la remoción bacteriana, los tejidos vegetales fueron sonicados a 50 Hz en PBS con y sin Tween-20 0,01% v/v, posteriormente se desinfectaron en hipoclorito de sodio (NaClO) al 3% v/v y etanol al 70% v/v. Se realizó recuento en placa en medio TSA. Los tiempos óptimos de cada tratamiento se determinaron a través de un análisis de regresión simple. Se visualizó la superficie de los tejidos a través de microscopía confocal luego de realizar DOPE-FISH para el dominio Bacteria. Los resultados indicaron que la mayor remoción bacteriana se logró al sonicar en PBS con Tween-20 0,01% durante 120s con una tasa igual a 1,1 x106 ufc/s/g de tubérculo y 3,0 x106 ufc/s/g de raíz, mientras que la inmersión óptima para NaClO 3% fue de 5 min y etanol 70% de 4 min. Las imágenes superficiales validaron el procedimiento. Se concluye, que la remoción es eficiente al utilizar Tween-20 en PBS y que este pre-tratamiento favorece la desinfección química.
Más información
Fecha de publicación: | 2016 |
Idioma: | Español |