Abstract

La presente tecnología corresponde a un bioensayo para detectar dioxinas y compuestos similares en baja concentración el cual comprende realizar cultivos celulares con células transfectadas transientemente o con una línea celular transfectada de forma estable con el vector β actina-mCherry-AhR-XRE-GFP, el cual está compuesto por una primera región de detección de contaminantes, y una segunda región correspondiente a un sistema de respuesta. El uso de este vector, que produce una isoforma de AhR de alta sensibilidad, permite aplicar el bioensayo a tipos celulares que normalmente no responden a dioxinas. Las células posteriormente son incubadas en presencia de la muestra problema procesada previamente, luego son lavadas con buffer y tripsinizadas, para ser resuspendidas en buffer hasta lectura mediante citometría de flujo. La presencia o ausencia de dioxinas se determina comparando el aumento de la población de células sobre el límite mínimo de fluorescencia roja y verde respecto a una muestra control. Además se protege el uso del bioensayo que permite la detección de dioxinas en un número elevado de muestras provenientes de distintas matrices, con alta sensibilidad, reproducibilidad y de forma rápida.