Cambios en la establidad de microtúbulos en neuritas de células PC12 co-cultivadas con linfocitos infectados con el virus HTLV-1

Pando, M. Elsa; Maldonado, H.; Kettlun, AM; Ramirez, Eugenio; Collados, L; Cartier, L.; Valenzuela M.. A

Abstract

La Paraparesia EspásticaTropical es una axonopatía que afecta las neuronas motoras del haz corticoespinal. La enfermedad se atribuye a la proteina viral tax secretada desde linfocitosTreg infectados con HTLV-1. La degeneración axonal en pacientes con paraparesia comienza con el desensamblaje de los microtúbulos desde la región distal, atribuyéndose a fallas en el transporte antérogrado axonal.Como modelo in vitro de degeneración axonal atribuida al HTLV-I se utilizaron células PC 12 diferenciadas co-cultivadas a través de membrana semipermeable con linfocitos infectados con HTLV-1 (células MT2). Como control se usaron linfocitos no infectados (células K-562). El ensayo se realizó hasta los 60 min, lisando posteriormente los cultivos de PC 12. En este modelo se estudió el efecto de los productos secretados por las células MT2 sobre las modificaciones postraduccionales de las tubulinas (-tubulina tirosinada, -destirosinada y total) componentes de los microtúbulos y que son indicadoras de la estabilidad neurítica.El cambio en las modificaciones postraduccionales en las tubulinas se midió por western blot de los Usados de PC 12 control, PC 12/ MT2 y PC 12/K-562. Para evaluar la presencia de tax en el medio del co-cultivo por westernblot se concentraron previamente las proteínas con TCA. En los co-cultivos PC12/MT2 se observó un aumento de la -tubulina tirosinada respecto a la tubulina total, lo que daría cuenta de que los productos virales modifican extracelularmente la estabilidad de los microtúbulos produciendo una forma más inestable que podría explicar la retracción neurítica producida.

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Fecha de publicación: 2009
Año de Inicio/Término: Septiembre
Página de inicio: 60
Idioma: español
Financiamiento/Sponsor: FONDECYT 1080396