EFECTO DE ESTRÉS OXIDATIVO IN VITRO EN COMPLEJOS OVOCITO-CUMULUS: EVALUACIÓN DEL POTENCIAL DE DESARROLLO EMBRIONARIO, CALIDAD Y PERFIL DE EXPRESIÓN GÉNICA EN BOVINOS

Loren, Pía; Sánchez-Villalba E.; Risopatron, J; Arias, ME; Felmer R.; Sánchez, R

Abstract

La exposición de ovocitos mamíferos a diferentes tipos de estrés induce tolerancia a estrés en embriones mamíferos, mejorando su resistencia y rendimiento en procedimientos in vitro. El objetivo fue evaluar el efecto de la exposición de complejos ovocito-cumulus (COCs) bovinos a peróxido de hidrógeno (H2O2) sobre el potencial de desarrollo embrionario, calidad y expresión génica. COCs maduros fueron incubados con H2O2 (0, 25, 50, 75 y 100 μM) por 1 hora antes de la fecundación in vitro (IVF = día 0). Los presuntos cigotos fueron cultivados hasta el día 7. El desarrollo embrionario fue evaluado al día 3 y al día 7. La calidad embrionaria fue determinada por tinción diferencial y ensayo TUNEL. La expresión génica relativa fue evaluada luego de la extracción de ARN y síntesis de ADNc. Diferencias entre los grupos experimentales fue determinada utilizando ANOVA de una vía, mientras que la expresión génica fue evaluada utilizando REST 2009. La división no fue afectada por el tratamiento utilizado, mientras que la formación de blastocistos disminuyó al utilizar altas concentraciones. La calidad embrionaria fue similar entre blastocistos pre-tratados con 25 y 0 μM, mientras que con los otros tratamientos disminuye de manera dosis-dependiente. La expresión génica demostró una regulación negativa comparada con el control en: SOD1, HIF1A, nNOS, iNOS, CDX2, OCT4 y NANOG. En conclusión, H2O2 a altas concentraciones causa fallas en el desarrollo embrionario, calidad y expresión génica, mientras que bajas concentraciones podrían inducir tolerancia a estrés y podrían tolerar mejor procesos altamente estresantes, como la criopreservación.

Más información

Fecha de publicación: 2016
Año de Inicio/Término: 3-5 de Diciembre, 2016
Página de inicio: 10
Página final: 10
Idioma: Español/Portugues