Abstract

La exposición de ovocitos a estresores como la presión hidrostática, estrés osmótico y oxidativo, puede inducir tolerancia al estrés en los embriones producidos in vitro. En este trabajo se estudió el efecto de la exposición de los complejos cúmulo-ovocito (COCs)a nitroprusiato de sodio (SNP) sobre la generaciòn de embriones in vitro. Los COCs se incubaron con SNP por 1 h en medio de maduración (Control sin SNP, 10-6M, 10-5M y 10-4M SNP).Se realizó la fecundación in vitro y cultivo embrionario, evaluándose la división y blastocistos al día 7. Mediante tinción del Trofoectodermo(TE) con el anticuerpo cdx2-texas red y de células totales (Hoechst)se analizó la relación entre TE y las células del macizo celular interno(ICM). Se evaluó la expresión génica en un qPCR, Stratagene MX 3000P y el software Agilent MX pro 4.1. La división embrionaria fue mayor en el control vs. 10-4M SNP (82 ± 8.4% vs. 77 ± 7.1%) y mayor en 10-5M vs. 10-4M SNP (84.9 ± 4.1% vs. 77 ± 7.1%). El % de blastocistos fue mayor en el control vs.10-4M SNP (34.1 ± 7.8 % vs. 26.2 ± 4.9%). No se observó diferencias en el desarrollo embrionario (iniciales, expandidos o eclosionados), ni en la calidad embrionaria (ICM: TE). La expresión génica no mostró diferencias estadísticas entre los tratamientos (iNOS,eNOS, nNOS, HSP70, HSP90, HIF1A, PRDX5 y BCL2A). La exposición de los ovocitos a 10-4M SNP perjudica el desarrollo embrionario. Sin embargo, tanto la calidad embrionaria como el patrón de expresión génica se mantuvieron similares. Queda por dilucidar si la exposición a estrés nitrosativo puede inducir mayor sobrevivencia en los embriones cuando estos son sometidos a estresores importantes como ocurre en el proceso de crio preservación. FONDECYT 1130888 y Beca doctoral de C.CH. (CONICYT, CHILE).