Abstract

La transferencia de genes media por espermatozoides (SMGT) es un método que consiste en incubar espermatozoides con ADN exógeno aprovechando la capacidad que tienen los espermatozoides para unir e internalizar ADN para después utilizarlos como vectores para introducir nueva información genética al ovocito durante la fecundación. Ha sido una herramienta útil para la producción de ratones transgénicos, pero sigue siendo bastante ineficaz en bovinos. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de distintas concentraciones (5, 10 ,20, 30 U/ml) de estreptolisina (SLO) al incubar los espermatozoides con ADN exógeno sobre la integridad de la membrana plasmática (SYBR/IP), el estado del acrosoma (PNA/FITC), motilidad (CASA), integridad del ADN (TUNEL) y finalmente, la capacidad de unión del ADN exógeno y lugar de ADN (Nick Translation) por medio de citometría de flujo y microscopio confocal. Nuestros resultados mostraron que el 99% de los espermatozoides unieron el ADN, incluyendo el control, la localización del ADN se observó principalmente en la región-post acrosomal en el grupo control, al utilizarse SLO la unión del ADN se mostró en toda la estructura del espermatozoide. En cuanto la calidad espermática disminuyó al utilizarse ADN exógeno (P<0.05). Los espermatozoides incubados con SLO disminuyeron la viabilidad de una manera dependiente de la dosis (P<0.05). Sin embargo, esta disminución no afecta los estándares de calidad espermática previstos en bovinos. Nuestros resultados demuestran que el uso de la SLO sobre los espermatozoides puede ser utilizada como una estrategia para mejorar la eficiencia de la SMGT. FONDECYT 11130724. CR: Becario Doctorado CONICYT