EXPRESIÓN DE GENES DE PLURIPOTENCIA Y MARCADORES DE DIFERENCIACIÓN TEMPRANA EN BLASTOCISTOS BOVINOS PRE-TRATADOS CON SIN-1

Loren, P.; Cheuquemán, C.; Risopatrón, J.; Arias, ME.; Felmer, R.; Sánchez, R.

Abstract

La segregación de las líneas celulares que darán lugar al macizo celular interno (ICM) y el trofoectodermo (TE) es determinada por la expresión de factores de transcripción, OCT4 y CDX2; así como la expresión del factor de pluripotencia, NANOG. La exposición de ovocitos mamíferos por cortos periodos de tiempo a diversos tipos de estrés puede generar tolerancia a este en embriones mamíferos. El objetivo del estudio fue evaluar la expresión de OCT4, NANOG y CDX2 en blastocistos bovinos pre-tratados con un inductor de estrés oxidativo y nitrosativo, 3-morfolinosidnonimina (SIN-1). Ovocitos bovinos inmaduros fueron madurados durante 22-23 horas. Posteriormente, los ovocitos maduros fueron incubados con SIN-1 (Control, 10-7, 10-6, 10-5 y 10-4 M SIN-1) por 1 hora. La co-incubación de los gametos fue realizada durante 18 horas. Los presuntos cigotos fueron cultivados hasta el día 7. Los blastocistos bovinos expandidos fueron utilizados para el análisis de expresión génica relativa mediante RT-qPCR, observándose una regulación positiva de los niveles de expresión relativa de OCT4, NANOG y CDX2 en todos los tratamientos comparado con el grupo control, aunque esta sobreexpresión no es significativa. En conclusión, es posible generar embriones tolerantes a estrés oxidativo y nitrosativo, sin la alteración del desarrollo embrionario y manteniendo una adecuada segregación de las líneas celulares del ICM y TE. Proyecto Fondecyt 1130888, Conicyt, Gobierno de Chile. Beca de Doctorado Nacional, Conicyt, Gobierno de Chile.

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Fecha de publicación: 2015
Año de Inicio/Término: 4 al 7 de Septiembre de 2015
Página de inicio: 90
Página final: 90