Abstract

Más de 24.000 personas están viviendo con el VIH en Cuba y más del 70% estaban recibiendo tratamiento antirretroviral a finales de 2015. Estudios previos han informado una incidencia alarmante de subtipos no B y de resistencia del VIH1 a los antirretrovirales (ARV) en Cuba. En países con amplios recursos, los pacientes con VIH resistente a múltiples fármacos son tratados con Maraviroc. En Cuba, este medicamento nunca se ha utilizado y hay pocos informes sobre la caracterización molecular del lazo V3 del VIH-1, relacionado con resistencia a esta droga. Estas condiciones indican la necesidad urgente de la vigilancia de la resistencia a los ARV. Con este fin en el año 2009 fue implementado por Aleman et al. un ensayo genotípico casero que permite la determinación de la resistencia del VIH-1 a los inhibidores de la proteasa (IP) y la transcriptasa inversa análogos (ITIAN) y no análogos de nucleósidos (ITINAN). Además, actualmente la susceptibilidad de los subtipos no-B a los ARV es objeto de mucha atención, son escasos los datos de secuenciación de estos subtipos y se recomienda una mayor investigación sobre este tema. Objetivo: Evaluar el impacto de la aplicación de los ensayos genotípicos de resistencia del VIH-1 en la terapia antirretroviral en Cuba. Diseño del estudio: Se evaluó la exactitud, la fidelidad (sensibilidad y especificidad) y la precisión (repetitividad y reproducibilidad) del ensayo genotípico casero y se comparó con el ensayo comercial ViroSeq (aprobado por la FDA). Utilizando el ensayo casero se analizaron 926 muestras de plasma recibidas en el IPK entre abril del 2009 y diciembre 2014 para estudios de resistencia a los ARV (584 de pacientes con fallo de la terapia y 342 de individuos no tratados). Se empleó el ensayo descrito por Van Laethem K et al. para la determinación del tropismo viral y la resistencia al Maraviroc en 42 muestras de plasma recibidas entre enero de 2014 y enero del 2015. También se realizó este análisis en 317 secuencias cubanas obtenidas de la base de datos de Los Álamos. Resultados: El ensayo casero logró un alto grado de exactitud. La sensibilidad y la especificidad en la detección de mutaciones de resistencia fueron 94.1% y 99.5%, respectivamente. La precisión del ensayo casero fue muy alta, con valores de repetitividad y reproducibilidad de 98.7% y 99.9%, respectivamente. Empleando este ensayo se observó que la distribución de los subtipos no cambió significativamente entre 2009 y 2014, aunque la incidencia de los recombinantes BG se incrementó a partir del 2009 (p=0.002). La incidencia de mutaciones de resistencia en muestras de individuos no tratados fue alta (11,4%), principalmente a la combinación ITIAN+ITINAN, la más utilizada en la primera línea de terapia en Cuba. En las muestras de pacientes tratados la resistencia a IP disminuyó a partir del 2009 (p<0.05). Desde ese año también se observa una disminución de la incidencia de la multidrogorresistencia (p=0,003) y de la resistencia completa a ITIAN y a IP (p<0.0001). Las mutaciones M184V y L210W (asociadas con resistencia al ABC, FTC, 3TC, AZT y d4T) incidieron con más frecuencia en las muestras del CRF19_cpx (p<0.0001), mientras que I50V y V82T (relacionadas con la resistencia a LPV/r) prevalecieron entre las formas recombinantes BG (p<0,05). El tropismo X4 fue predominante en los virus CRF19_cpx (p=0.011) lo cual pudiera limitar el empleo del Maraviroc en los pacientes infectados con este recombinante. Conclusiones: El IPK dispone de un ensayo de resistencia con elevadas fidelidad y precisión. Con la aplicación en Cuba de los ensayos genotípicos ha disminuido la frecuencia de la resistencia del en los pacientes tratados; sin embargo, la resistencia en individuos no tratados es alta. Algunos recombinantes circulantes en Cuba presentan proporción alta de mutaciones asociadas a la resistencia a ciertos antirretrovirales. El CRF19_cpx es una forma genética con una proporción alta de virus X4-trópico lo que apoya la hipótesis de que este recombinante cubano pudiera ser un virus más patogénico.